البصمة الوراثية و استخداماتها الطبية الشرعية

البصمة الوراثية و استخداماتها الطبية الشرعية

—لمحة عن المتواليات المتكررة القصيرة المعتمدة في الطب الشرعي STRs short tandem repeats —مراحل العمل على تحضير البصمة الوراثية في المخبر —استخراج الـ DNA —تحضير تفاعل الـ PCR —Multiplex PCR —رحلان العينات على جهاز الرحلان الكهربائي الشعري ABI310 Sequencer —قراءة النتائج و تفسيرها من وجهة النظر الطبية الشرعية. —تطبيقات عملية للبصمة الوراثية في الطب الشرعي و أمثلة عن ذلك — في تحاليل النسب و— الآثار الحيوية.

أسس بيولوجية عامة في العلوم الجينية (الـ DNA )

—تتوضع مادة الإنسان الوراثية في معظمها داخل النواة و القليل جداً في السيتوبلازما داخل الميتوكوندريا.
العلوم الجينية

المتواليات المتكررة القصيرة Short Tandem Repeats STR

—Satellite DNA —Minisatellite DNA (VNTR) 10-100 bp —Microsatellite DNA (STRs) (SSRs) 2-6 bp
المتواليات المتكررة القصيرة
 

الأنماط الشكلية المتغيرة لـ STRs

—تغيرات في عدد الأسس في المتوالية di-, tri-, tetra-, penta-, hexanucleotides. —تغيرات في عدد تكرار المتواليات. —تغيرات في مواقع هذه المتواليات المتكررة.

Short Tandem Repeat (STR)

مثال على موقع STR

موقع STR
 

تسمية الأليلات لمواقع الـ STR حسب توصيات ISFG

—اختيار سلسلة الـ DNA الأساس لوصف موقع الـ STR —المواقع المجاورة لمورثات (VWA ) —مواقع غير مجاورة لمورثات. —مواقع مسماة سابقاً —اختيار وصف المتوالية الأساس و تسمية التكرار (الأليل). —وصف المتوالية من البداية 5 —المتوالية غير الكاملة microvariantes —استخدام المقارن الـ Ladder

كيف تتم تسمية المواقع المعتمدة في التنميط ؟…

—مثال على تسمية موقع STR D16S539 —D: DNA —16: chromosome —S: single copy sequence —539: 539th locus described on chromosome 16
البصمة الوراثية

مراحل العمل المخبري للحصول على البصمة الوراثية

—تحضير العينات —استخراج الـ DNA —تضخيم المواقع المرادة على سلسلة الـ DNAPCR)) —ترحيل منتج التضخيم على جهاز الرحلان الكهربائي الشعري.

شروط حفظ العينات

—كتابة معلومات كافية على العينات المرفوعة. —ارتداء كفوف عقيمة و تبديلها مع كل رفع أثر جديد. —تجفيف العينات الرطبة بشكل جيد جداً قبل تغليفها. —رفع أكبر عدد ممكن من الآثار. —توثيق الآثار بالصور قبل رفعها للحفظ سيما الآثار الدموية. —الحفظ في حرارة الغرفة للآثار الجافة و في المجمدة للآثار الرطبة.

ما هي الآثار الحيوية الممكن تحليلها ؟…

—تضم مجموعات الآثار الحيوية —الآثار الدموية —المفرزات ( المني ، اللعاب ، مفرزات المهبل ،  العرق ) —الشعر ( شعر الجسم والعانة و—) —الأنسجة وأجزاء الجلد ( تحت الأظافر أو على أداة الفعل )

لمحة عن تفاعل الـ PCR

—هو تفاعل أنظيمي لمضاعفة منطقة من سلسلة الـ DNA مرات و مرات. —البادئات المستخدمة هي التي تحدد منطقة التفاعل. —الحجم النهائي المستخدم في أنبوب التفاعل من µ20-50

عينة المراقبة السلبية و الإيجابية

—لمراقبة التفاعل —العينة السلبية لمراقبة التلوث في عملية التفاعل —العينة الإيجابية لتقييم مكونات و عناصر التفاعل و معايير جهاز الحرارة الدورية

تقييم تحليل النسب

—التحليل السلبي: لنفي النسب باعتماد الـ STRs يجب أن نحصل على 3 إختلافات في 3 أنظمة متوضعة على 3 صبغيات مختلفة. —التحليل الإيجابي: يكون في هذه الحالة بحساب نسبة أن يكون هذا الرجل بهذا النمط الوراثي ونسبة لسكان الأرض هو الأب الحقيقي للطفل.

تقييم تحليل النسب